DCT0003 0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液,不含酚紅

產品簡介

胰蛋白酶（Trypsin）簡稱胰酶 ，是一種絲氨酸水解酶 ，能把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基端切斷 。在組織細胞的提取 、培養 ，以及體外細胞培養過程中 ，均會使用到胰蛋白酶消化液 ，用於水解細胞間蛋白質 ，使組織或細胞離散成單個細胞 。胰酶在37℃ pH 8.0條件下消化能力最強 。常用胰酶工作濃度為0.25% 。EDTA可以螯合鈣鎂離子 ，胰酶溶液中搭配EDTA使用可以加速細胞間連接蛋白的水解 ，起到增強消化的效果 。酚紅是一種pH指示劑 ，溶液偏堿性時呈紫紅色 ，偏酸性時呈橘紅色 ，近中性時呈粉紅色 。

本產品為0.25%胰蛋白酶消化液，含0.25%胰蛋白酶 ，溶於Hank’s緩衝液 ，含0.9 mM EDTA ，無酚紅指示劑 ，經0.22 μm過濾除菌 。

儲存與運輸

幹冰（dry ice）運輸 ；-20℃保存 ，有效期12個月 。避免反複凍融 。

操作說明

貼壁細胞

1. 吸去細胞培養液 ，用無菌的PBS 、Hanks液或無血清培養液洗滌細胞去除殘餘的血清 。

2. 加入適量本產品覆蓋細胞 ，室溫靜置消化1-5 min 。

1. 顯微鏡下觀察 ，當細胞出現明顯收縮 ，用移液槍輕輕吹打細胞較容易將細胞吹打下來時 ，吸除胰酶細胞消化液 ，加入含血清的細胞培養液 ，輕輕吹打下細胞 ，製成細胞懸液 ，即可直接傳代培養 。如果用移液槍輕輕吹打時很難使細胞從板底脫落 ，表明消化時間不夠 ，可加入胰酶細胞消化液重新消化 。切忌避免過度消化 。

注意事項

1. 由於組織或細胞性質不同 ，實驗人員應依據具體情況 ，確定最佳消化時間 ；消化細胞時間不宜過長 ，否則會影響細胞貼壁和生長狀況 。

2. 本產品不含抑菌劑 ，在使用過程中要特別注意無菌操作 ，避免消化液被微生物汙染 。

3. 本產品不宜4℃長期保存 ，避免反複凍融 ，建議分裝成小份後-20℃保存 。

4. 對於胰酶中EDTA 、酚紅的選擇 ，可以根據實驗需要 ，對於一般的腫瘤細胞 ，選擇含EDTA的胰酶消化液 。對於較敏感 、脆弱的細胞 ，例如原代細胞及很容易消化的細胞 ，選擇不含EDTA的胰酶消化液 ，如果細胞特別敏感 ，需要選擇胰蛋白酶濃度更低的消化液 。如果是需要用於流式細胞儀檢測細胞凋亡 ，則選用不含EDTA的胰酶消化液 。

5. 由於Hank’s溶液中NaHCO₃含量較低 ，不建議將本產品用於37℃的CO₂培養箱中消化 ，如果放入CO₂相 ，溶液會迅速變酸性 。

6. 為了您的安全和健康 ，請穿實驗服並戴一次性手套操作 。

產品僅供科研用途 ，不用於臨床診斷 ！