【技術視頻】細胞劃痕實驗

實驗步驟 ：

1.取出六孔板

2.將六孔板做好標記

3.用marker筆在6孔板背後

4.大約間隔0.5~1cm ，每孔做5個標記

5.用直尺比著 ，均勻的劃橫線

6.橫穿過孔 ，每孔至少穿過5條線

7.每孔加入2mL培養基

8.每孔加入約5×10⁵個細胞

9.具體數量因細胞不同而不同 ，掌握為過夜能鋪滿

10.將培養板放入培養箱過夜培養

11.取出培養板

12.顯微鏡下觀察細胞密度為100%即可進行劃痕檢測

13.將培養板放入操作台

14.用移液器取1mL槍頭套一個200μL槍頭

15.取下槍頭 ，比著培養板蓋子 ，盡量垂至於背後的橫線劃痕

16.槍頭要垂直 ，不能傾斜 ，注意不要碰到蓋子

17.動作要快速 ，果斷 ，不宜過重或過輕

18.去除培養基

19.用PBS清洗去除劃下的細胞

20.加入含不同藥物的無血清培養基繼續培養

21.在0h 、48h分別拍照 ，拍照時選取記號筆畫的線和細胞劃痕的交點作為觀察點 ，以定點觀察 。

細胞劃痕實驗（1）

細胞劃痕實驗（2）