如何將H9c2(2-1)養得更好 ？

H9c2（2-1）（大鼠心肌細胞）是由胚胎BD1X大鼠心髒組織衍生的原始克隆細胞係的亞克隆 ，並表現出骨骼肌的許多特性 。該細胞中的成肌細胞能融合形成多核的肌管 ，並對乙酰膽堿的刺激發生反應 。如果培養基中的血清濃度下降到1% ，H9c2(2-1)細胞融合會發生得很快 。該細胞係是檢測細胞發育的有效模型係統 。

本期為大家總結了 ，在培養H9c2（2-1）細胞過程中 ，特別需要注意的地方 。

細胞複蘇

溶解細胞過程要迅速 ；已溶解的凍存細胞不能在常溫下存放太久 ，需要盡快離心去除DMSO 。

細胞凍存

推薦配比 ：55%基礎培養基+40%FBS+5%DMSO的凍存液；

細胞凍存時 ，盡量吹散細胞 ，注意控製吹打力度 。

細胞培養

H9c2（2-1）細胞為貼壁細胞 ，正常細胞形態為梭形 。

培養條件

培養基 ：DMEM＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 ：1:2-1:4

推薦換液頻率 ：2~3次/周

培養箱 ：37℃ ，5% CO2

傳代操作

去掉培養皿中的培養基 ，加入PBS進行衝洗 ，並去上清 ；

加入0.25%胰酶進行潤洗 ，並去上清 ；

放入CO2培養箱消化2-4min ；

加入完全培養基終止消化 ，並吹打均勻 。

常見問題及解答

為什麽會出現細胞表麵顆粒較多的現象 ？

可能是培養環境有問題 ，可以改用DMEM/F-12培養基培養 ，傳三代後會恢複平整細胞表麵 。

為什麽會出現空泡 ？

可能是鋪板時鋪得不夠均勻 ，局部過於密集 ，密集地方的細胞就開始狀態變差 、空泡增多 。也可能是血清差 ，需要更換優質血清 ，及時換液 。

為什麽細胞長得慢 ？

可能是細胞接種得太少 ，細胞密度太低。可以先培養 ，然後消化重新鋪瓶 ，提高密度培養 。

為什麽細胞狀態變差 ，容易漂 ？

可能是血清問題 ，建議換血清 ，並注意血清要程序解凍 ，不能水浴化開 ；也有可能是細胞生長密集 ，需要及時傳代 ，並不是細胞長滿才傳代，當有個別地方長得過於密集 ，容易疊加的時候應該就要傳代了 。

注意

在培養過程中 ，保持細胞匯合度30％～90％ ；

每一步操作都要輕柔小心 ，以免細胞受損 ；

選用優質培養基 ，減少有害物質對細胞的刺激 。