MEM細胞培養基細胞培養是實驗室裏最常見和最基本的實驗了 ,但卻不是最簡單的 。別小看細胞培養 ,這裏可蘊含著大學問 。有時候細胞狀態不好 ,轉染 、藥篩這些實驗根本就沒辦法做 。影響細胞培養的因素很多 ,讓我們先從培養基和血清說起 。經典的培養基有很多種 ,Invitrogen (GIBCO) 、Thermo Fisher(HyClone) 、Sigma等公司都可以提供 。其中DMEM 、RPMI 1640 、MEM 、DM
2021-08-04 藍冠娛樂生物 583
細胞冷凍與複蘇是細胞培養的常規工作 ,可以解決細胞因為連續繼代造成的退變或轉化 。細胞的原代培養和傳代培養以及細胞凍存和複蘇後都需要細胞計數 。一 、細胞冷凍保存1 、材料 :生長良好之培養細胞 、新鮮培養基 、DMSO (Sigma D-2650) 、無菌塑料冷凍保存管(Nalgene 5000-0020) 、0.4%(w/v)trypan blue(GibcoBRL15250-061) 、血球計數盤與蓋玻片 、等速降
2021-08-03 藍冠娛樂生物 378
許多同學對細胞消化做了許多研究 ,得出了很多有價值的經驗 ,也見到很多人的困惑 。其實細胞培養 ,尤其是細胞係的培養 ,就消化而言,不是太難 ,做得多了 ,善於總結經驗 ,就能把細胞越養越好 。今天 ,隻講一些基本操作背後的知識 ,如果不對之處 ,歡迎指正 ,一起討論 :1 、其實絕大部分細胞消化的時候是隻要用胰酶潤洗一遍即可 ,吸去胰酶後 ,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表麵的微量胰酶在37度一般不到2min足
2021-08-02 藍冠娛樂生物 493
一 、自噬誘導劑 (1) Bredeldin A / Thapsigargin / Tunicamycin :模擬內質網應激(2) Carbamazepine/ L-690 ,330/ Lithium Chloride(氯化鋰) :IMPase抑製劑(即Inositol monophosphatase ,肌醇單磷酸酶)(3) Earle's平衡鹽溶液 :製造饑餓(4) N-Acetyl-D-sph
2021-08-02 藍冠娛樂生物 309
內皮細胞(endothelial cells)覆蓋血管的內表麵 ,上皮細胞則是覆蓋內部器官的內表麵 。上皮細胞同時還覆蓋人體的外表麵 。尿檢時如果在尿液中發現大量的上皮細胞 ,則表明尿路感染 。 構成組織的內皮細胞與上皮細胞都來源於上皮 ,但這兩者在位置 ,結構 ,功能上均有所不同 。此外 ,這兩種細胞都構成了內層與外環境的接觸麵(interface) 。內皮細胞位於身體的"內部&q
2021-07-26 藍冠娛樂生物 1604
細胞的消化傳代操作步驟 :1.點燃酒精燈 ,用酒精棉球擦拭台麵 ;用酒精噴壺給手及所需使用的試劑瓶表麵消毒2.使用鑷子小心的打開培養瓶瓶蓋3.倒出廢液4.加入2mlPBS清洗兩遍細胞5.加入1ml胰酶消化6.放入培養箱計時3分鍾 ,具體時間因細胞而異 ,黏附越強 ,消化時間越長7.對光觀察細胞狀態 ,是否變成霧狀清晰可見8.最好在鏡下觀察細胞變圓時終止消化9.加入1ml培養基終止消化10.槍頭輕輕吹打 ,使培養瓶
2021-07-20 藍冠娛樂生物 581
現在國內已經有很多做原代培養技術成熟的公司和課題組 ,但由於自身平台有限很難聯係到那些課題組 ,且對方可能也不願分享 ,而商業公司多以技術壁壘 、商業機密 、專利等借口不願意提供具體培養的細節 ,在網上也難以獲取靠譜的實驗流程 ,國內外的論文也是各執一詞 ,沒有形成統一 、高效的培養體係 ;大多數科研者也沒有時間和金錢去驗證其真偽 ,有的文章培養出來的幹細胞連三係分化驗證圖都沒有 ,而流式細胞術的驗證圖想要
2021-07-19 藍冠娛樂生物 706
細胞凍存和複蘇技術是細胞培養過程中較為基礎的實驗操作 ,此舉對於細胞的保種以及細胞活力的維持有著重要意義 ,下麵就細胞凍存及複蘇過程中的一些理論及實踐拿來與大家分享 。細胞凍存和複蘇的原則是 :慢凍速融,這樣更加有利於保持細胞的活力 。凍存細胞不加任何保護劑 ,會導致細胞內冰晶的產生 ,從而使細胞產生內源性的機械損傷 ,引起細胞內環境滲透壓 ,PH ,電解質等的改變 ,進而促使細胞死亡 。常用的凍存保護劑為二甲基亞碸(D
2021-07-12 藍冠娛樂生物 906